Alendronate sodique
C4H12NNaO7P2·3H2O 325,12
Acide phosphonique, (4-amino-1-hydroxybutylidène)bis-, sel monosodique, trihydraté.
Trihydrogène (4-amino-1-hydroxybutylidène)diphosphonate de sodium, trihydraté [121268-17-5].
» L'alendronate sodique ne contient pas moins de 98,0 pour cent et pas plus de 102,0 pour cent de C4H12NNaO7P2, calculé sur la base séchée.
Emballage et stockage- Conserver dans des contenants bien fermés. Conserver à température ambiante.
Normes de référence USP<11>-
USP Alendronate sodique RS
Identification-
R : Absorption infrarouge <197 M>.
B : Il répond aux exigences du test de flamme pour le sodium<191>.
Perte au séchage<731>- Séchez-le à une pression n'excédant pas 5 mm de mercure à 140 à poids constant : il ne perd pas moins de 16,1 % et pas plus de 17,1 % de son poids.
Métaux lourds, Méthode III<231> : 0,001 %.
Pureté chromatographique-
Solution de borate et diluant - Préparez comme indiqué dans le test.
Solution tampon - Transférer 5,88 g de citrate de sodium dihydraté et 2,84 g de phosphate dibasique de sodium anhydre dans une fiole jaugée de 2 l, diluer avec de l'eau jusqu'au volume et mélanger. Ajustez avec de l'acide phosphorique à un pH de 8 et faites passer la solution à travers un filtre ayant une porosité de 0,5-µm ou plus fine.
9-Solution de chloroformiate de fluorénylméthyle- Préparez une solution dans l’acétonitrile contenant environ 4 mg de chloroformiate de 9-fluorénylméthyle par ml. Préparez cette solution fraîche juste avant utilisation.
Solution A- Préparer un mélange filtré et dégazé de solution tampon et d'acétonitrile (17:3).
Solution B- Préparer un mélange filtré et dégazé d'acétonitrile et de solution tampon (7:3).
Phase mobile- Utilisez des mélanges variables de solution A et de solution B comme indiqué pour le système chromatographique. Effectuez des ajustements si nécessaire (voir Adéquation du système sous Chromatographie<621>).
Solution mère étalon- Préparez une solution d'USP Alendronate Sodium RS dans un diluant ayant une concentration connue d'environ 0,6 mg par ml.
Solution standard- Transférer 5,0 mL de la solution mère étalon dans un tube à centrifuger en polypropylène de 50 - mL, à bouchon à vis, contenant 5 mL de solution de borate. Ajouter 5 mL d’acétonitrile et 5 mL de solution de 9-Fluorenylmethyl chloroformiate et agiter pendant 45 secondes. Laisser reposer à température ambiante pendant 30 minutes. Ajouter 20 ml de chlorure de méthylène et agiter vigoureusement pendant 1 minute. Centrifugez pendant 5 à 10 minutes et utilisez une partie de la couche aqueuse supérieure transparente.
Solution étalon diluée - Diluer une partie de la solution mère étalon avec du diluant pour obtenir une solution ayant une concentration connue d’environ 0,6 µg par mL. En utilisant 5 ml de cette solution, procédez comme indiqué pour la solution étalon, en commençant par « dans un tube à centrifuger en polypropylène de 50 ml, à bouchon à vis ».
Blanc réactif- En utilisant une portion de 5,0 - mL de diluant, procédez comme indiqué pour la solution standard, en commençant par « dans un tube à centrifuger en polypropylène de 50 - mL, à bouchon à vis ».
Solution de test- Transférer environ 30 mg d'alendronate sodique, pesés avec précision, dans une fiole jaugée de 50 ml, dissoudre et diluer avec le diluant jusqu'au volume, puis mélanger. En utilisant un volume de 5,0 - ml de cette solution, procédez comme indiqué pour la solution standard, en commençant par « dans un tube à centrifuger en polypropylène de 50 - ml, à bouchon à vis ».
Système chromatographique (voir Chromatographie<621>)- Le chromatographe liquide est équipé d'un détecteur de 266-nm et d'une colonne de 4,1-mm × 25-cm contenant le garnissage L21. Le débit est d'environ 1,8 ml par minute. La température de la colonne est maintenue à environ 45°C. Le chromatographe est programmé comme suit.
Temps (minutes) Solution A (%) Solution B (%) Élution
0 100 0 équilibrage
0-15 100→50 0→50 pente linéaire
15-25 50→0 50→100 pente linéaire
25-27 0→100 100→0 pente linéaire
27-32 100 0 isocratique
Chromatographez la solution étalon et la solution étalon diluée, et enregistrez les réponses des pics comme indiqué pour la procédure : le facteur de queue pour le pic principal dans le chromatogramme de la solution étalon n'est pas supérieur à 2,0 ; et le pic à cet endroit dans le chromatogramme de la solution étalon diluée est détectable avec un rapport signal-sur-bruit d'au moins 3.
Procédure- Injectez séparément des volumes égaux (environ 20 µL) de la solution de test et du blanc de réactif dans le chromatographe, enregistrez les chromatogrammes et mesurez les réponses pour tous les pics. Ne tenez pas compte des pics correspondant à ceux obtenus à partir du blanc réactif. Calculez le pourcentage de chaque impureté dans la portion d’Alendronate Sodium prise par la formule :
100(ri/rs)
dans laquelle ri est l'aire de chaque pic d'impureté, et rs est la somme de tous les pics d'impuretés et du pic principal : pas plus de 0,1 % de chaque impureté individuelle n'est trouvé, et pas plus de 0,5 % du total des impuretés n'est trouvé.
Dosage-
Solution tampon - Transférer 14,7 g de citrate de sodium dihydraté et 7,05 g de phosphate de sodium dibasique anhydre dans une fiole jaugée de 1 litre, diluer avec de l'eau jusqu'au volume, mélanger et ajuster avec de l'acide phosphorique jusqu'à un pH de 8.
Diluant- Dissoudre 29,4 g de citrate de sodium dihydraté dans l'eau dans une fiole jaugée de 1 litre, diluer avec de l'eau jusqu'au volume et mélanger.
Solution de borate- Dissoudre 19,1 g de borate de sodium dans l'eau dans une fiole jaugée de 1 litre, diluer avec de l'eau jusqu'au volume et mélanger.
9-Solution de chloroformiate de fluorénylméthyle- Préparez une solution dans l’acétonitrile contenant environ 0,5 mg de chloroformiate de 9-fluorénylméthyle par ml. Préparez cette solution fraîche juste avant utilisation.
Phase mobile- Préparez un mélange filtré et dégazé de solution tampon, d'acétonitrile et de méthanol (70:25:5). Effectuez des ajustements si nécessaire (voir Adéquation du système sous Chromatographie<621>).
Préparation de bouillon standard- Préparez une solution d'USP Alendronate Sodium RS dans un diluant ayant une concentration connue d'environ 0,1 mg par ml. Calculez la concentration, CS, d’alendronate sodique anhydre dans cette solution.
Préparation standard- Transférer 5,0 ml de la préparation mère standard dans un tube à centrifuger en polypropylène de 50 ml, à bouchon à vis, contenant 5 ml de solution de borate. Ajouter 5 ml de solution de chloroformiate de 9-fluorénylméthyle et agiter pendant 30 secondes. Laisser reposer à température ambiante pendant 25 minutes. Ajouter 25 ml de chlorure de méthylène et agiter vigoureusement pendant 1 minute. Centrifuger pendant 5 à 10 minutes. Utilisez une partie de la couche aqueuse supérieure transparente.
Blanc réactif- En utilisant 5,0 ml de diluant, procédez comme indiqué pour la préparation standard, en commençant par « dans un tube à centrifuger en polypropylène de 50 ml, à bouchon à vis ».
Préparation du stock d'analyse - Transférer environ 25 mg d'alendronate sodique, pesés avec précision, dans une fiole jaugée de 250 ml, dissoudre et diluer avec le diluant jusqu'au volume, puis mélanger.
Préparation du test- En utilisant 5,0 ml de la préparation mère du test, procédez comme indiqué pour la préparation standard, en commençant par « dans un tube à centrifuger en polypropylène de 50 - ml, à bouchon à vis ».
Système chromatographique (voir Chromatographie<621>)- Le chromatographe liquide est équipé d'un détecteur de 266-nm et d'une colonne de 4,1-mm × 25-cm contenant le garnissage L21. Le débit est d'environ 1,2 ml par minute. La température de la colonne est maintenue à environ 35°C. Chromatographez la préparation standard et enregistrez les réponses maximales comme indiqué pour la procédure : l'efficacité de la colonne n'est pas inférieure à 1 500 plateaux théoriques, le facteur de traînée n'est pas supérieur à 1,5 et l'écart type relatif pour les injections répétées n'est pas supérieur à 2,0 %.
Procédure— Injectez séparément des volumes égaux (environ 10 µL) de la préparation standard, de la préparation de test et du blanc de réactif dans le chromatographe, enregistrez les chromatogrammes et mesurez les réponses pour les pics majeurs. Calculez la quantité, en mg, de C4H12NNaO7P2 dans la portion d'Alendronate Sodium prise par la formule :
DCS (rU/rS)
dans laquelle D est le facteur de dilution pour la préparation mère du test ; CS est tel que défini dans la préparation standard du stock ; et rU et rS sont les réponses d'aire de pic pour l'acide alendronique obtenues à partir de la préparation du test et de la préparation standard, respectivement.