Chlorhydrate de gemcitabine
C9H11F2N3O4·HCl 299,66
Cytidine, 2′-désoxy-2′,2′-difluro-, monochlorhydrate.
2′-Désoxy-2′,2′-monochlorhydrate de difluorocytidine (β-isomère) [122111-03-9].
» Le chlorhydrate de gemcitabine ne contient pas moins de 97,5 pour cent et pas plus de 101,5 pour cent de C9H11F2N3O4·HCl, calculé tel quel.
[Attention - Le chlorhydrate de gemcitabine est un agent cytotoxique puissant. Il faut faire très attention pour éviter d’inhaler des particules et d’y exposer la peau.]
Conditionnement et stockage-Conserver dans des contenants hermétiques.
Étiquetage-Lorsqu'il est destiné à être utilisé dans la préparation de formes posologiques injectables, l'étiquette indique qu'il est stérile ou qu'il doit être soumis à un traitement ultérieur lors de la préparation de formes posologiques injectables.
Normes de référence USP<11>-
USP Cytosine RS
USP Endotoxine RS
USP Chlorhydrate de gemcitabine RS
Identification-
R : Absorption infrarouge <197K>.
B : Il répond aux exigences des tests pour le chlorure<191>.
Rotation spécifique<781S> : entre +43 et +50, à 20.
Solution d'essai : 10 mg par mL.
pH<791> : entre 2,0 et 3,0, dans une solution à 10 mg par mL.
Résidus au feu<281> : pas plus de 0,1 %.
Métaux lourds, Méthode I<231> : 0,001 %.
Pureté chromatographique-
Solution A- Procédez comme indiqué pour la phase mobile du test.
Solution B-Préparer du méthanol filtré et dégazé.
Phase mobile-Utilisez des mélanges variables de solution A et de solution B comme indiqué sous Système chromatographique. Effectuer des ajustements, si nécessaire (voir Adéquation du système sous Chromatographie 621).
Solution d’adéquation du système-Procédez comme indiqué dans le test.
Solution standard-Dissoudre une quantité pesée avec précision de chlorhydrate de gemcitabine RS USP et de cytosine RS USP dans l'eau, et diluer quantitativement, et par étapes si nécessaire, pour obtenir une solution ayant une concentration connue d'environ 2 µg par ml de chacun.
Solution de test-Transférer environ 50 mg de chlorhydrate de gemcitabine, pesés avec précision, dans une fiole jaugée de 25 - mL, dissoudre et diluer avec de l'eau jusqu'au volume, puis mélanger.
Système chromatographique (voir Chromatographie 621) - Procéder comme indiqué sous Test. Le chromatographe est programmé comme suit.
Temps (minutes) Solution A (%) Solution B (%) Élution
0–8 97 3 isocratique
8–13 97®50 3®50 pente linéaire
13–20 50 50 isocratique
20–25 50®97 50®3 rééquilibrage
Chromatographez la solution d'adéquation du système et enregistrez les réponses maximales comme indiqué pour la procédure : les temps de rétention relatifs sont d'environ 0,5 pour la gemcitabine -anomère et de 1,0 pour la gemcitabine ; la résolution, R, entre la gemcitabine -anomère et la gemcitabine n'est pas inférieure à 8,0 ; et le facteur de queue pour la gemcitabine n'est pas supérieur à 1,5. Chromatographez la solution standard et enregistrez les réponses maximales comme indiqué pour la procédure : les temps de rétention relatifs sont d'environ 0,1 pour la cytosine et 1,0 pour la gemcitabine ; l'écart type relatif pour les injections répétées n'est pas supérieur à 2,0 %.
Procédure-Injectez séparément un volume (environ 20 µL) de la solution étalon et de la solution test dans le chromatographe, enregistrez le chromatogramme et mesurez toutes les réponses maximales. Calculez le pourcentage de cytosine dans la portion de Gemcitabine prise par la formule :
2,5(Cc/W)(rt/rs)
dans laquelle Cc est la concentration de Cytosine RS USP dans la solution étalon, en µg par mL ; W est le poids, en mg, de Gemcitabine prise ; rt est la réponse maximale pour la cytosine dans la solution test ; et rs est la réponse pour la cytosine dans la solution étalon : pas plus de 0,1 % de cytosine n'est trouvé. Calculez le pourcentage de chaque impureté autre que la cytosine dans la portion de Gemcitabine prise par la formule :
2,5(Cs/W)(ri/rs)
dans laquelle Cs est la concentration de chlorhydrate de gemcitabine USP RS dans la solution étalon, en µg par mL ; W est le poids, en mg, de Gemcitabine prise ; ri est la réponse maximale pour chaque impureté dans la solution d'essai ; et rs est la réponse due à la gemcitabine dans la solution étalon : pas plus de 0,1 % de gemcitabine -anomère ou de toute autre impureté individuelle n'est trouvé ; et la somme de toutes les impuretés ne dépasse pas 0,2 %. Exclure de la somme de toutes les impuretés tous les pics inférieurs à la limite de quantification (0,02 %).
Autres exigences-Lorsque l'étiquette indique que le chlorhydrate de gemcitabine est stérile, il répond aux exigences relatives aux endotoxines bactériennes et à la stérilité de la Gemcitabine pour injection. Lorsque l'étiquette indique que le chlorhydrate de gemcitabine doit être soumis à un traitement ultérieur lors de la préparation des formes posologiques injectables, il répond aux exigences relatives aux endotoxines bactériennes sous Gemcitabine pour injection.
Dosage-
Phase mobile-Préparer une solution filtrée et dégazée contenant 13,8 g de phosphate de sodium monobasique et 2,5 mL d'acide phosphorique dans 1000 mL d'eau. [note-Le pH de cette solution est compris entre 2,4 et 2,6. ]
Solution d'adéquation du système - Transférez environ 10 mg de chlorhydrate de gemcitabine dans un petit flacon, ajoutez 4 ml d'une solution contenant 168 mg d'hydroxyde de potassium par ml de méthanol, fermez hermétiquement et soniquez. Chauffer à 55°C pendant 6 à 16 heures, laisser refroidir et transférer le contenu dans une fiole jaugée de 100-mL avec des lavages successifs d'acide phosphorique à 1% (v/v). Diluer avec 1% d'acide phosphorique au volume et mélanger. [remarque-Cette solution contient environ 0,02 mg par ml de gemcitabine α-anomer.]
Préparation standard - Dissoudre une quantité pesée avec précision de chlorhydrate de gemcitabine RS USP dans l'eau et diluer quantitativement, et par étapes si nécessaire, avec de l'eau pour obtenir une solution ayant une concentration connue d'environ 0,1 mg par ml.
Préparation du test-Transférer environ 20 mg de chlorhydrate de gemcitabine, pesés avec précision, dans une fiole jaugée de 200 - mL, dissoudre et diluer avec de l'eau jusqu'au volume, puis mélanger.
Système chromatographique (voir Chromatographie<621>)-Le chromatographe liquide est équipé d'un détecteur de 275-nm et d'une colonne de 4,6-mm × 25-cm contenant 5-µm de garnissage L7. Le débit est d'environ 1,2 ml par minute. Chromatographez la solution d'adéquation du système et enregistrez les réponses maximales comme indiqué pour la procédure : la résolution, R, entre la gemcitabine -anomère et la gemcitabine n'est pas inférieure à 8,0 ; et le facteur de queue déterminé à partir de la gemcitabine n'est pas supérieur à 1,5. Chromatographez la préparation standard et enregistrez les réponses maximales comme indiqué pour la procédure : l'écart type relatif pour les injections répétées n'est pas supérieur à 1,0 %.
Procédure-Injectez séparément des volumes égaux (environ 20 µL) de la préparation standard et de la préparation de test dans le chromatographe, enregistrez les chromatogrammes et mesurez les réponses pour les pics majeurs. Calculez la quantité, en mg, de C9H11F2N3O4·HCl dans la portion de chlorhydrate de gemcitabine prise par la formule :
200C(RU/RS)
dans laquelle C est la concentration, en mg par mL, de chlorhydrate de gemcitabine USP RS dans la préparation standard ; et rU et rS sont les réponses maximales obtenues respectivement à partir de la préparation du test et de la préparation standard.