DÉFINITION
L'arginine contient au moins 98,5 pour cent et au maximum l'équivalent de 101,0 pour cent d'acide (S)-2-amino-5-guanidinopentanoïque, calculés par rapport à la substance séchée.
PERSONNAGES
Aspect : poudre cristalline blanche ou presque blanche ou cristaux incolores, hygroscopiques. Solubilité : librement soluble dans l'eau, très légèrement soluble dans l'éthanol (96 pour cent).
IDENTIFICATION
Première identification : A, C.
Deuxième identification : A,B,D,E
A. Il est conforme au test de rotation optique spécifique (voir Tests).
B. La solution S (voir Tests) est fortement alcaline (2.2.4).
C. Examiner par spectrophotométrie d'absorption infrarouge (2.2.24), en comparant avec le spectre obtenu avec l'arginine CRS. Examiner les substances préparées sous forme de disques.
D. Examiner les chromatogrammes obtenus lors du test des substances positives à la ninhydrine. La tache principale du chromatogramme obtenu avec la solution d'essai (b) est similaire en position, couleur et taille à la tache principale du chromatogramme obtenu avec la solution témoin (a).
E. Dissoudre environ 25 mg dans 2 ml d'eau R. Ajouter 1 ml de solution d'α-naphtol R et 2 ml d'un mélange à volumes égaux de solution forte d'hypochlorite de sodium R et d'eau. Une couleur rouge se développe.
ESSAIS
Solution S. Dissoudre 2,5 g d'eau distillée et diluer à 50 ml avec le même solvant.
Apparition de solution. La solution S est limpide (2.2.1) et pas plus intensément colorée que la solution de référence BY6 (2.2.2, méthode II).
Rotation optique spécifique (2.2.7). Dissoudre 2,00 g dans l'acide chlorhydrique R1 et diluer à 25,0 ml avec le même acide. Le pouvoir rotatoire spécifique est de + 25,5 à + 28,5, calculé par rapport à la substance séchée.
Ninhydrine-substances positives. Examiner par chromatographie sur couche mince (2.2.27), en utilisant une plaque de gel de silice CCM R.
Solution d’essai (a). Dissoudre 0,10 g de la substance à examiner dans de l'acide chlorhydrique dilué et diluer à 10 ml avec le même acide.
Solution d’essai (b). Diluer 1 ml de solution d'essai (a) à 50 ml avec de l'eau R.
Solution de référence (a). Dissoudre 10 mg d'arginine CRS dans de l'acide chlorhydrique 0,1 M et diluer à 50 ml avec le même acide.
Solution de référence (b). Diluer 5 ml de solution à tester (b) à 20 ml avec de l'eau R.
Solution de référence (c). Dissoudre 10 mg d'arginine CRS et 10 mg de chlorhydrate de lysine CRS dans de l'acide chlorhydrique 0,1 M et diluer à 25 ml avec le même acide.
Appliquer sur la plaque 5 µl de chaque solution. Laissez la plaque sécher à l’air. Développer sur un parcours de 15 cm en utilisant un mélange de 30 volumes d'ammoniaque concentrée R et 70 volumes de 2-propanol R. Sécher la plaque entre 100°C et 105°C jusqu'à disparition complète de l'ammoniaque. Pulvériser avec la solution de ninhydrine R et chauffer entre 100°C et 105°C pendant 15 min. Aucune tache du chromatogramme obtenu avec la solution d'essai (a), à l'exception de la tache principale, n'est pas plus intense que la tache du chromatogramme obtenu avec la solution témoin (b) (0,5 pour cent). Le test n'est valide que si le chromatogramme obtenu avec la solution témoin (c) montre deux points clairement séparés.
Chlorures (2.4.4). A 5 ml de solution S, ajoutez 0,5 ml d'acide nitrique dilué R et complétez à 15 ml avec de l'eau R. La solution satisfait au test limite pour les chlorures (200 ppm).
Sulfates (2.4.13). A 10 ml de solution S, ajouter 1,7 ml d'acide chlorhydrique dilué R et compléter à 15 ml avec de l'eau distillée R. La solution satisfait au test limite pour les sulfates (300 ppm).
Ammonium (2.4.1). 50 mg est conforme au test limite B pour l'ammonium (200 ppm). Préparer l'étalon en utilisant 0,1 ml de solution étalon d'ammonium (100 ppm NH4) R.
Fer (2.4.9). Dans une ampoule à décanter, dissoudre 1,0 g dans 10 ml d'acide chlorhydrique dilué R. Agiter avec trois quantités de 10 ml chacune de méthylisobutylcétone R1 en agitant à chaque fois 3 min. Aux couches organiques combinées, ajoutez 10 ml d’eau et secouez pendant 3 min. La couche aqueuse satisfait au test limite pour le fer (10 ppm).
Métaux lourds (2.4.8). Dissoudre 2,0 g dans l'eau R et diluer à 20 ml avec le même solvant. 12 ml de solution sont conformes au test limite A pour les métaux lourds (10 ppm). Préparer l'étalon en utilisant la solution étalon de plomb (1 ppm Pb) R.
Perte au séchage (2.2.32). Pas plus de 0,5 pour cent, déterminé sur 1 000 g par séchage au four à 105 ℃
Cendres sulfatées (2.4.14). Pas plus de 0,1 pour cent, déterminé sur 1,0 g.
ESSAI
Dissoudre 0,150 g dans 50 ml d'eau R. A l'aide de 0,2 ml de solution mixte rouge de méthyle indicateur Ras, titrer avec de l'acide chlorhydrique 0,1 M jusqu'à ce que la couleur passe du vert au violet-rouge.
1 ml d'acide chlorhydrique 0,1 M équivaut à 17,42 mg de C6H14N4O2.
STOCKAGE
Conserver à l'abri de la lumière.