Fluorouracile
C4H3FN2O2 130,08
2,4(1H,3H)-Pyrimidinedione, 5-fluoro-;
5-Fluorouracile [51-21-8]; UNII : U3P01618RT.
DÉFINITION
Le fluorouracile contient 98,0 % de NLT et 102,0 % de NMT d'urouracile (C4H3FN2O2), calculés sur base séchée.
[ ATTENTION- Il faut faire très attention pour éviter d'inhaler des particules de fluorouracile et d'y exposer la peau.]
IDENTIFICATION
Modifier pour lire :
• A. TESTS D'IDENTIFICATION SPECTROSCOPIQUE<197>, Spectroscopie Infrarouge : 197M (CN 1-MAI-2020)
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• B. TESTS D'IDENTIFICATION SPECTROSCOPIQUE<197>, Spectroscopie Ultraviolet-Visible : 197U (CN 1-MAI-2020)
Milieu : tampon acétate pH 4,7 préparé à partir de 8,4 g d'acétate de sodium et 3,35 ml d'acide acétique glacial mélangé à de l'eau pour obtenir 1 000 ml
Solution d'échantillon : 10 µg/mL dans un milieu
Critères d'acceptation : Répond aux exigences
• C. Le temps de rétention du pic principal de la solution échantillon correspond à celui de la solution standard, tel qu'obtenu dans le test.
ESSAI
• PROCÉDURE
Tampon : 6,8 g/L de phosphate monobasique de potassium dans l'eau. Ajuster avec de l'hydroxyde de potassium 5 M à un pH de 5,7 ± 0,1.
Phase mobile : Acétonitrile et Tampon (5:95)
Solution étalon : 10 µg/mL de USP Fluorouracile RS dans l'eau
Solution échantillon : 10 µg/mL de Fluorouracile dans l'eau
Système chromatographique
(Voir Chromatographie<621>, Adéquation du système.)
Mode : LC
Détecteur : UV 254 nm
Colonne : 4,6-mm × 25-cm ; 5-µm emballage L1
Débit : 1,0 mL/min
Volume d'injection : 20 µL
Adéquation du système
Échantillon : Solution étalon
Exigences d'aptitude
Écart type relatif : NMT 0,73 %, solution standard
Facteur de queue : NMT 1,5, solution standard
Analyse
Échantillons : solution standard et solution échantillon
Calculez le pourcentage d'urouracile (C4H3FN2O2) dans la portion de Fluorouracile prise :
Résultat = (ru /rs ) × (Cs /Cu ) × 100
ru = réponse maximale de la solution échantillon
rs = réponse maximale de la solution standard
Cs = concentration de USP Fluorouracile RS dans la solution étalon (µg/mL)
Cu = concentration de Fluorouracile dans la solution échantillon (µg/mL)
Critères d'acceptation : 98,0%-102,0% sur base séchée
IMPURETÉS
• RÉSIDUS À L'INFLAMMATION<281> : NMT 0,1%
• IMPURETÉS ORGANIQUES
Protéger la solution étalon et la solution échantillon de la lumière.
Phase mobile : 6,8 g/L de phosphate monobasique de potassium dans l'eau. Ajuster avec de l'hydroxyde de potassium 5 M à un pH de 5,7 ± 0,1.
Solution étalon : 0,1 µg/mL de chacun de USP Fluorouracile RS, USP Fluorouracile Related Composé A RS, USP Fluorouracile Related
Composé B RS et USP Uracil RS, et 0,2 µg/mL de composé E RS apparenté au fluorouracile USP en phase mobile
Solution échantillon : 0,1 mg/mL de Fluorouracile en phase mobile
Système chromatographique
(Voir Chromatographie<621>, Adéquation du système.)
Mode : LC
Détecteur : UV 266 nm
Colonne : 4,6-mm × 25-cm ; 5-µm emballage L1
Débit : 1,0 mL/min
Volume d'injection : 20 µL
Temps d'exécution : NLT 3 fois le temps de rétention du pic d'urouracile
Adéquation du système
Échantillon : Solution étalon
Exigences d'aptitude
Résolution : NLT 2 entre les pics de l'uracile et de l'urouracile
Analyse
Échantillons : solution standard et solution échantillon
Calculer le pourcentage de composé A apparenté à l'urouracile, de composé B apparenté à l'urouracile et d'uracile dans la partie de
Fluorouracile pris :
Résultat = (ru /rs ) × (Cs /Cu ) × 100
ru = réponse maximale du composé pertinent lié à l'urouracile à partir de la solution échantillon
rs = réponse maximale du composé pertinent lié à l'urouracile à partir de la solution étalon
Cs = concentration du composé pertinent lié à l'urouracile dans la solution étalon (mg/mL)
Cu = concentration de Fluorouracile dans la solution échantillon (mg/mL)
Calculez le pourcentage de 5-méthoxyuracile, de composé E apparenté à l'urouracile et de toute impureté non spécifiée dans la partie de
Fluorouracile pris :
Résultat = (ru /rs ) × (Cs /Cu ) × (1/F) × 100
ru = réponse maximale de chaque impureté de la solution échantillon
rs = réponse maximale de l'urouracile de la solution étalon
Cs = concentration de USP Fluorouracile RS dans la solution étalon (mg/mL)
Cu = concentration de Fluorouracile dans la solution échantillon (mg/mL)
F = facteur de réponse relatif pour chaque impureté individuelle (voir tableau 1)
Critères d'acceptation : Voir tableau 1. Ne pas tenir compte de tout pic d'impureté inférieur à 0,05 %.
Tableau 1
Nom Temps de rétention relatif Facteur de réponse relatif Critères d’acceptation, NMT (%)
Composé apparenté au fluorouracile A a 0,5 – 0,15
Composé apparenté au fluorouracile B b 0,7 – 0,15
Uracile 0,9 – 0,15
Nom Temps de rétention relatif Facteur de réponse relatif Critères d’acceptation, NMT (%)
Fluorouracile 1.0 – -
5-Méthoxyuracile c 1,6 0,67 0,15
Composé apparenté au fluorouracile E d 1,9 0,77 0,15
Toute impureté individuelle non spécifiée – 1,0 0,10
Impuretés totales – - 0,5
  une Pyrimidine-2,4,6(1H,3H,5H)-trione.
  b Dihydropyrimidine-2,4,5(3H)-trione.
  c 5-Méthoxypyrimidine-2,4(1H,3H)-dione.
  d 5-Chloropyrimidine-2,4(1H,3H)-dione.
• LIMITES DU COMPOSÉ F ET DE L'URÉE LIÉS AU FLUOROURACIL
Diluant : Méthanol et eau (1:1)
Solution étalon A : 0,025 mg/mL de composé apparenté au fluorouracile USP F RS dans un diluant
Solution étalon B : 0,02 mg/mL d’USP Urea RS dans du méthanol
Solution échantillon : 10 mg/mL de fluorouracile dans un diluant
Système chromatographique
(Voir Chromatographie<621>, Chromatographie en couche mince.)
Mode : CCM
Adsorbant : mélange de gel de silice chromatographique
Volume d'application : 10 µL
Système de solvant de développement : acétate d'éthyle, méthanol et eau (70:15:15)
Réactif : Préparez une solution à 10-mg/mL de p-diméthylaminobenzaldéhyde dans de l'alcool anhydre. Préparez un mélange de cette solution
et acide chlorhydrique (10:1).
Analyse
Échantillons : solution étalon A, solution étalon B et solution échantillon
Procédure : Développer avec le système de solvant de développement, suivi d'un séchage à l'air. Examinez la plaque sous lumière UV à 254 nm pour
Composé F lié à l'urouracile. Pulvériser la plaque au moins deux fois avec le réactif et sécher la plaque dans une étuve à 80° pendant 3 à 4 min.
Examinez la plaque à la lumière du jour pour l'urée. [ REMARQUE - L'urée produit une tache jaune et l'urouracile n'est pas détecté par le spray.]
Critères d'acceptation : La tache du composé F lié à l'urouracile dans la solution échantillon n'est pas plus intense que la tache de
Composé F apparenté à l'urouracile provenant de la solution standard A (NMT 0,25 %). La tache d'urée dans la solution d'échantillon n'est plus
intense que la tache d'urée de la solution étalon B (NMT 0,2 %).
TESTS SPÉCIFIQUES
• PERTE AU SÉCHAGE<731>
Analyse : Sécher sous vide sur pentoxyde de phosphore à 80° pendant 4 h.
Critères d'acceptation : NMT 0,5%
EXIGENCES SUPPLÉMENTAIRES
• CONDITIONNEMENT ET CONSERVATION : Conserver dans des contenants étanches et résistants à la lumière.
• NORMES DE RÉFÉRENCE USP<11>
USP Fluorouracile RS
Composé apparenté au fluorouracile USP A RS
Pyrimidine-2,4,6(1H,3H,5H)-trione.
C4H4N2O3 128,09
Composé apparenté au fluorouracile USP B RS
Dihydropyrimidine-2,4,5(3H)-trione.
C4H4N2O3 128,09
Composé apparenté au fluorouracile USP E RS
5-Chloropyrimidine-2,4(1H,3H)-dione.
C4H3ClN2O2 146,53
Composé apparenté au fluorouracile USP F RS
2-Éthoxy-5-uoropyrimidin-4(1H)-un.
C6H7FN2O2 158,13
USP Uracile RS
Uracile.
C4H4N2O2 112,09