DÉFINITION
Le succinate de polyéthylène glycol de vitamine E est un mélange formé par l'estérification du succinate d'acide d-alpha tocophéryle et du polyéthylène glycol. Le mélange d'esters est principalement constitué de polyéthylène glycol mono-estérifié et d'une petite quantité de polyéthylène glycol di-estérifié. Il contient du NLT 25,0 % de d-alpha tocophérol (C29H50O2).
IDENTIFICATION
• A. Test d'identification par chromatographie en phase gazeuse
Analyse : Procéder comme indiqué dans le test de teneur en alpha-tocophérol.
Critères d'acceptation : Le temps de rétention du pic majeur de la solution Echantillon correspond à celui de la solution Standard.
COMPOSITION
• Teneur en Alpha Tocophérol
Solvant : 0,25 mL de phénolphtaléine TS dans 1 L d'alcool
Solution étalon interne : 12 mg/mL d'arachidate d'éthyle dans l'isooctane
Solution étalon : Transférer 32,5 mg d'USP Alpha Tocopherol RS dans un flacon de réaction approprié. Ajouter 2 ml de pyridine et 0,5 ml de N,O-bis(triméthylsilyl)trifluoroacétamide avec 1 % de triméthylchlorosilane et chauffer le ballon à 100 °C pendant 10 min. Refroidissez le flacon, ajoutez 5,0 ml de solution étalon interne suivi de 20 ml d'isooctane et agitez.
Solution échantillon : Transférer une quantité équivalente à 0,100 à 0,160 g de succinate de polyéthylène glycol de vitamine E fondu à 60 °C dans un tube de culture (environ 20 cm de long et 2,5 cm de diamètre) équipé d'un bouchon à vis. Ajoutez 40 à 50 mg d'acide ascorbique et quelques copeaux bouillants, suivis de 20 ml de solvant. [Remarque - Faites refluer doucement la solution sans émission de contenu.] Placez le tube dans un bloc chauffant réglé à 100-150. Lorsque l'échantillon est complètement dissous, ajouter 0,25 g d'hydroxyde de potassium et continuer à refluer pendant 30 min. Retirez le tube du feu et pendant que le contenu est encore chaud, ajoutez goutte à goutte 1 à 2 ml d'acide chlorhydrique jusqu'à ce que la coloration rose disparaisse. [Attention-Réaction exothermique. Laisser l'acide s'écouler à l'intérieur du tube pour éviter les éclaboussures.] Refroidir le tube, puis laver les parois du tube avec 20 ml d'eau. Ajoutez 5,0 ml de solution étalon interne, bouchez et agitez pour garantir un mélange complet. Laissez le tube reposer jusqu'à ce que deux couches distinctes se forment. Transférer 2,5 à 3,5 mL de la couche supérieure dans un flacon de réaction approprié et ajouter 2,0 mL de pyridine suivi de 2,5 mL de N,O-bis(triméthylsilyl)trifluoroacétamide avec 1 % de triméthylchlorosilane. Chauffer le ballon à 100 pendant 10 min. Laisser refroidir, puis ajouter 12 ml d'isooctane.
Système chromatographique
(Voir Chromatographie 621, Adéquation du système.)
Mode : GC
Détecteur : ionisation de flamme
Colonne : 0,25-mm × 15-m capillaire de silice fondue ; recouvert d'un film de 0,25-µm de phase G27
Température
Injecteur : 280
Détecteur : 345
Colonne : Voir le tableau 1.
Tableau 1
Température initiale (°) Rampe de température (°/min) Température finale (°) Temps de maintien à la température finale (min)
260 20 340 1
Gaz porteur : Hélium
Débit : 1,5 mL/min
Taille de l'injection : 1 µL
Type d'injection : rapport de division, 200:1
Adéquation du système
Échantillon : Solution étalon
Exigences d'aptitude
Facteur de queue : NMT 2,0 pour le pic d'alpha tocophérol
Écart type relatif : NMT 2,0 % pour le rapport entre la surface du pic de l'alpha-tocophérol et la surface du pic de l'étalon interne
Analyse
Échantillons : solution standard et solution échantillon
Calculez le pourcentage de d-alpha tocophérol (C29H50O2) dans la portion de succinate de polyéthylène glycol de vitamine E prise :
Résultat = (RU/RS) × (WS/WU) × 100
RU = rapport de l'étalon interne (aire du pic de l'alpha tocophérol/aire du pic de l'étalon interne) de la solution échantillon
RS = rapport de l'étalon interne (aire du pic de l'alpha tocophérol/aire du pic de l'étalon interne) de la solution étalon
WS = poids d'USP Alpha Tocopherol RS utilisé pour préparer la solution étalon (mg)
WU = poids de succinate de polyéthylène glycol de vitamine E pris pour préparer la solution échantillon (mg)
Critères d'acceptation : NLT 25,0 %
TESTS SPÉCIFIQUES
• Rotation optique, rotation spécifique 781S
[Remarque-Ce test identifie le d-alpha tocophérol après saponification.]
Solution échantillon : Transférer 0,9 g de succinate de polyéthylèneglycol de vitamine E, fondu à 60 °C, dans un tube à essai approprié muni d'un bouchon et dissoudre dans 10,0 mL d'alcool. Placez le tube dans un bloc chauffant réglé à 100-105. [Remarque-Refluxez doucement la solution sans émission de contenu. ] Lorsque l'échantillon est complètement dissous, ajoutez 2 à 3 pastilles d'hydroxyde de sodium et continuez à refluer pendant 30 minutes supplémentaires. Retirer le tube du feu et pendant que le contenu est encore chaud, neutraliser en utilisant la phénolphtaléine comme indicateur en ajoutant lentement 10 ml d'un mélange d'eau et d'acide chlorhydrique (1:1) jusqu'à disparition de la couleur rose. [Attention-Réaction exothermique. Laisser la solution acide couler à l'intérieur du tube pour éviter les éclaboussures.] Refroidir le tube, le bouchon et agiter jusqu'à ce que le contenu soit bien mélangé. Ajouter 25,0 ml d’heptane, boucher et agiter pendant 1 min pour assurer un mélange complet. Laissez le tube reposer jusqu'à ce que deux couches distinctes se forment. Transférez la couche supérieure dans un tube de culture propre et sec, puis ajoutez 10,0 ml d’eau à la solution récupérée. Bouchez, secouez et laissez les couches se séparer. Transférez la couche supérieure dans un tube propre et sec. Ajouter 10,0 mL de solution de ferricyanure de potassium, préparée en dissolvant 2 g de ferricyanure de potassium dans 10,0 mL d’hydroxyde de sodium 0,2 M, et remettre le bouchon. Agiter vigoureusement pendant 45 s et laisser les couches se séparer pendant 30 min. Si la couche supérieure d'heptane est claire, procédez à la mesure pour une rotation spécifique ; s'il n'est pas clair, sécher sur du sulfate de sodium anhydre avant de procéder au test. [Remarque-Utilisez les résultats du test de teneur en alpha-tocophérol pour calculer la rotation spécifique.]
Critères d'acceptation : NLT +24,0
• Solubilité dans l'eau
Échantillon : 20 g de succinate de polyéthylène glycol de vitamine E fondu
Analyse : Placer l'échantillon dans un récipient en verre sur un agitateur magnétique. Ajoutez immédiatement 80 ml d'eau bouillante en remuant. Laisser refroidir à température ambiante sous agitation constante.
Critères d'acceptation : La solution devient claire en 3 h.
• Indice d'acidité
Échantillon : 1 g de succinate de polyéthylène glycol de vitamine E
Analyse : Dissoudre l'échantillon dans 25 mL d'un mélange d'alcool et d'éther (1:1) neutralisé en phénolphtaléine avec de l'hydroxyde de sodium 0,1 N. Ajouter 0,5 mL de phénolphtaléine TS et titrer avec de l’hydroxyde de sodium 0,10 N jusqu’à ce que la solution reste légèrement rose après agitation pendant 30 s.
Critères d'acceptation : NMT 0,027 mEq/g, équivalent à NMT 0,27 mL d'hydroxyde de sodium 0,10 N
EXIGENCES SUPPLÉMENTAIRES
• Conditionnement et stockage : Conserver dans des contenants hermétiques et conserver à l'abri de la lumière.
• Etiquetage : L'étiquetage indique la teneur en d-alpha tocophérol, exprimée en mg/g.
• Normes de référence USP 11
USP Alpha Tocophérol RS