Xylazine
C12H16N2S 220,34
4H-1,3-Thiazine-2-amine, N-(2,6-diméthylphényl)-5,6-dihydro-.
5,6-Dihydro-2-(2,6-xylidino)-4H-1,3-thiazine [7361-61-7].
» La xylazine ne contient pas moins de 98,0 pour cent et pas plus de 102,0 pour cent de C12H16N2S.
Emballage et stockage- Conserver dans des contenants hermétiques. Magasin à 25h, excursions autorisées entre 15h et 30h.
Étiquetage- Lorsqu'il est destiné à un usage vétérinaire uniquement, l'étiquette l'indique.
Normes de référence USP<11>
USP Xylazine RS
Identification-
R : Absorption infrarouge <197K>.
B : Absorption ultraviolette<197U>-
Solution : 5 µg par mL.
Milieu : acide chlorhydrique 0,1 N.
C : Test d'identification chromatographique en couche mince<201>-
Solution d'essai : 2 mg par mL, dans du chloroforme.
Système de solvants de développement : acétone, chloroforme et méthanol (2:1:1).
Procédure- Avant les applications de la solution test et de la solution étalon, séchez la plaque à 105 °C pendant au moins 30 minutes et laissez-la refroidir dans un dessiccateur. Laisser sécher les applications à l'aide d'un courant d'air chaud et développer. Examinez sous une lumière UV de courte longueur d'onde : la taille, l'intensité et la valeur RF du point principal obtenu à partir de la solution de test correspondent à celles du point principal obtenu à partir de la solution étalon.
Intervalle de fusion<741> : entre 136 et 142.
Perte au séchage<731>- Séchez-le sous vide à 60° pendant 4 heures : il ne perd pas plus de 0,5% de son poids.
Résidus au feu<281> : pas plus de 0,1 %.
Métaux lourds, Méthode II<231> : 20 µg par g.
Limite de 3-amino-1-propanol- Préparer une solution test de Xylazine dans du méthanol contenant 100 mg par mL, en utilisant la sonication pour obtenir la dissolution. Préparez une solution étalon de 3-amino-1-propanol dans du méthanol contenant 0,5 mg par ml. Appliquez séparément 5 µL de la solution de test et la solution étalon sur une plaque chromatographique en couche mince (voir Chromatographie<621>) recouverte d'une couche de 0,25-mm de gel de silice chromatographique. Laisser sécher les applications et développer les chromatogrammes dans une chambre chromatographique saturée, contenant un système de solvant constitué d'un mélange d'alcool et d'hydroxyde d'ammonium (80:20) jusqu'à ce que le front du solvant se soit déplacé d'environ trois quarts de la longueur de la plaque. Retirez la plaque de la chambre chromatographique, marquez le devant du solvant et séchez la plaque à l’air libre. Vaporisez la plaque avec une solution alcoolique de ninhydrine (1 : 500) et chauffez immédiatement la plaque dans un four à 105°C. Lorsque les taches sont visibles, retirez la plaque du four et laissez refroidir. Examinez les chromatogrammes et comparez les intensités des spots correspondant au 3-amino-1-propanol : l'intensité du spot pour le 3-amino-1-propanol obtenu à partir de la solution à tester n'est pas supérieure à celle du spot pour le 3-amino-1-propanol obtenu à partir de la solution étalon (0,5%).
Limite d'acétone et d'alcool isopropylique -
Diluant- Diluer 15 ml d'acide acétique glacial avec de l'eau jusqu'à 1 000 ml et mélanger.
Solution standard- Transférer 10,0 µL chacun d’acétone et d’alcool isopropylique dans une fiole jaugée de 500 - mL, diluer avec le diluant jusqu’au volume et mélanger. Cette solution contient 15,8 µg d'acétone par mL et 15,7 µg d'alcool isopropylique par mL.
Solution de test- Transférer environ 100 mg de Xylazine, pesés avec précision, dans une fiole jaugée de 10-mL, dissoudre et diluer avec le diluant jusqu'au volume, puis mélanger.
Système chromatographique (voir Chromatographie<621>)- Le chromatographe en phase gazeuse est équipé d'un détecteur à flamme-ionisation et d'une colonne de 2-mm × 1,8-m remplie de phase G25 à 0,1% sur 80- à 100-maille supporte S7. L'hélium est utilisé comme gaz porteur avec un débit d'environ 30 ml par minute. Les températures du port d'injection et du détecteur sont maintenues à environ 240 et 275, respectivement. Le système est programmé selon les étapes suivantes. La température de la colonne est maintenue à 30 °C pendant 6 minutes après chaque injection, puis augmentée jusqu'à 100 °C à raison de 10 °C par minute, puis augmentée encore jusqu'à 220 °C à raison de 15 °C par minute, et maintenue pendant 10 minutes. Chromatographez la solution étalon et enregistrez les réponses maximales comme indiqué pour la procédure : les temps de rétention relatifs sont d'environ 0,75 pour l'acétone et 1,0 pour l'alcool isopropylique ; la résolution R entre l'acétone et l'alcool isopropylique n'est pas inférieure à 2,0 ; le facteur de queue déterminé à partir de chaque pic d'analyte n'est pas supérieur à 2,0 ; et l'écart type relatif pour les injections répétées n'est pas supérieur à 2,0 %.
Procédure- Injectez séparément des volumes égaux (environ 2 µL) de la solution étalon et de la solution test dans le chromatographe, enregistrez les chromatogrammes et mesurez les zones des pics majeurs. Calculez les pourcentages d'acétone et d'alcool isopropylique dans la portion de Xylazine prise par la formule :
(C/E)(rU / rS)
dans laquelle C est la concentration, en µg par mL, d'acétone ou d'alcool isopropylique dans chaque mL de solution étalon ; W est le poids, en mg, de Xylazine pris pour préparer la solution d'essai ; et rU et rS sont les réponses pour le pic d'analyte pertinent obtenu respectivement à partir de la solution test et de la solution étalon : pas plus de 0,02 % d'acétone et pas plus de 0,2 % d'alcool isopropylique sont trouvés.
Pureté chromatographique-
Solution A, Solution B, phase mobile et diluant - Procédez comme indiqué dans le test.
Solution standard- Diluer quantitativement un volume mesuré avec précision de la préparation standard préparée dans le test avec diluant pour obtenir une solution ayant une concentration de 0,008 mg d'USP Xylazine RS par ml.
Solution de test- Transférez environ 100 mg de Xylazine, pesés avec précision, dans une fiole jaugée de 10 - mL, ajoutez 5,0 mL de solution B et agitez pour dissoudre. Ajoutez environ 4 ml de solution A et remuez. Diluer avec la solution A au volume et mélanger.
Système chromatographique (voir Chromatographie<621>)- Le chromatographe liquide est équipé d'un détecteur de 205-nm et d'une colonne de 4,6-mm × 25-cm qui contient le garnissage L7 et une colonne de garde. Le débit est d'environ 1 ml par minute. Equilibrer la colonne avec une phase mobile constituée de 75 % de solution A et 25 % de solution B. Maintenir cette composition pendant 8 minutes après chaque injection, après quoi la proportion de solution B est augmentée linéairement de 25 % à 70 % sur une période de 27 minutes, et maintenue à cette composition pendant 5 minutes ; puis augmenter rapidement la proportion de Solution A jusqu'à 75% avant l'injection suivante. Chromatographez la solution étalon et enregistrez les réponses maximales comme indiqué pour la procédure : le facteur de traînée n'est pas supérieur à 1,5 ; et l'écart type relatif pour les injections répétées n'est pas supérieur à 5,0 %.
Procédure- Injectez séparément des volumes égaux (environ 10 µL) de la solution étalon et de la solution test dans le chromatographe, enregistrez les chromatogrammes et mesurez les zones des pics majeurs. Calculez le pourcentage de chaque impureté dans la Xylazine pris par la formule :
1000(C/W)(ri F/rs)
dans laquelle C est la concentration, en mg par mL, de USP Xylazine RS dans la solution étalon ; W est le poids, en mg, de Xylazine pris pour préparer la solution d'essai ; ri est la réponse de tout pic d'impureté individuel dans le chromatogramme de la solution d'essai qui n'est pas présent dans le chromatogramme du diluant ; F est le facteur de réponse de 0,72 pour le pic de 2,6-diméthylaniline à un temps de réponse d'environ 0,8 par rapport au temps de rétention de la xylazine, de 0,36 pour une impureté à un temps de rétention relatif d'environ 1,3, de 0,37 pour l'isothiocyanate de 2,6-diméthylphényle à un temps de rétention relatif d'environ 2, et de 1,0 pour toute autre impureté ; et rS est la réponse du pic de xylazine dans le chromatogramme de la solution étalon : pas plus de 0,5 % d'une impureté individuelle n'est trouvée ; et la somme de toutes les impuretés trouvées ne dépasse pas 1 %.
Dosage-
Solution A- Dissoudre 3,03 g de 1-heptanesulfonate de sodium dans 800 ml d'eau, ajuster avec de l'acide sulfurique 2 N jusqu'à un pH de 3,0, diluer avec de l'eau jusqu'à 1 000 ml et mélanger. Passer à travers un filtre ayant une porosité de 0,5-µm ou plus fine.
Solution B- Utilisez de l'acétonitrile.
Phase mobile- Utilisez des mélanges variables de solution A et de solution B comme indiqué pour le système chromatographique.
Diluant- Préparez un mélange de solution A et de solution B (50:50).
Préparation standard- Préparez une solution d'USP Xylazine RS dans un diluant ayant une concentration connue d'environ 0,4 mg par ml.
Préparation du test- Transférer environ 10 mg de Xylazine, pesés avec précision, dans une fiole jaugée de 25 - mL, diluer avec le diluant au volume et mélanger.
Système chromatographique (voir Chromatographie<621>)- Le chromatographe liquide est équipé d'un détecteur de 226-nm et d'une colonne de 3,9-mm × 30-cm contenant le garnissage L1. Le débit est d'environ 1 ml par minute. Equilibrer la colonne avec une phase mobile constituée de 70 % de solution A et 30 % de solution B. Maintenir cette composition pendant 5 minutes après chaque injection, après quoi la proportion de solution B est augmentée linéairement de 30 % à 40 % sur une période de 5 minutes, et maintenue à cette composition pendant 5 minutes ; puis augmenter rapidement la proportion de Solution A jusqu'à 70 % avant l'injection suivante. Chromatographez la préparation standard et enregistrez les réponses maximales comme indiqué pour la procédure : le facteur de traînée n'est pas supérieur à 2,0 ; et l'écart type relatif pour les injections répétées n'est pas supérieur à 2,0 %.
Procédure- Injectez séparément des volumes égaux (environ 10 µL) de la préparation standard et de la préparation de test dans le chromatographe, enregistrez les chromatogrammes et mesurez les zones des pics majeurs. Calculez la quantité, en mg, de C12H16N2S dans la portion de Xylazine prise par la formule :
25C(RU/RS)
dans laquelle C est la concentration, en mg par mL, de USP Xylazine RS dans la préparation standard ; et rU et rS sont les réponses maximales de xylazine obtenues respectivement à partir de la préparation du test et de la préparation standard.